体外转染KISS-1基因对SW480细胞系侵袭和迁移力的影响

岭南现代临床外科 ›› 2011, Vol. 11 ›› Issue (01): 13-16.

体外转染KISS-1基因对SW480细胞系侵袭和迁移力的影响

李旺林¹,张伟健²,杨平¹,陈熙文¹,王强³,梁立源¹

1. 广州医学院附属广州市第一人民医院
2. 广州市第一人民医院胃肠外科
3. 番禺区中医院

通讯作者: 李旺林
基金资助:
广州市医药卫生科技项目资助

Received:2011-01-11 Revised:2011-01-13 Online:2011-02-20 Published:2011-03-08

摘要/Abstract

摘要： 目的:探讨人肿瘤转移抑制基因KiSS -1对人结肠癌SW480细胞增殖、侵袭、迁移能力的影响。方法将携有KISS-1基因的重组真核表达质粒pRc／CMV2一KISS-1转化大肠杆菌DH5et并扩增，抽提纯化质粒并进行酶切鉴定，pRc／CMV2一KISS-1体外转染SW480细胞(SW480一FH1T)，筛选稳定转染的细胞并扩增培养，以转染了空质粒pRc／CMV2的SW480细胞(SW480一pRc／CMV2)和正常SW480细胞为对照，用RT—PCR检测KISS-1的表达情况，并用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT法)和细胞侵袭实验和迁移实验分别检测KISS-1基因转染前、后SW480细胞增殖、侵袭和迁移活性的变化。结果 pRc／CMV2一KISS-1的酶切鉴定证实含有目的基因KISS-1；SW480一KISS-1细胞的RT—PCR产物经凝胶电泳有明显的阳性条带，而对照组则无；MTT实验结果显示重组质粒转染组SW480细胞的增殖明显受到抑制；Transwell体外侵袭实验显示转染pRc／CMV2一KISS-1能明显抑制SW480细胞的体外侵袭力(P<0．01)；体外迁移实验显示转染pRc／CMV2一KISS-1能明显抑制SW480细胞的体外迁移力(P<0．01)。结论:KiSS-1基因能显著抑制人结肠癌SW480细胞的侵袭和迁移能力,在结肠肿瘤的转移中起重要作用。

关键词: KISS -1基因, 结肠肿瘤, SW480细胞, 侵袭, 迁移

李旺林张伟健杨平陈熙文王强梁立源. 体外转染KISS-1基因对SW480细胞系侵袭和迁移力的影响[J]. 岭南现代临床外科, 2011, 11(01): 13-16.

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