岭南现代临床外科 ›› 2017, Vol. 17 ›› Issue (06): 654-664.DOI: 10.3969/j.issn.1009-976X.2017.06.006
黄佐於 谢琳 欧阳乐平 何明亮 刘家豪 刘安民*
HUANG Zuoyu, XIE Lin,OUYNAG Leping,HE Mingliang,LIU Jiahao,LIU Anmin.
摘要: 目的 探索环状RNA-circ-VCAN在胶质瘤中功能及作用机制。方法 荧光定量PCR验证环状RNA-circ-VCAN在正常胶质细胞以及胶质瘤细胞中的表达情况;核质分离实验验证circ-VCAN在细胞核质分布情况;RNaseR消化线性RNA实验验证circ-VCAN对RNaseR消化的抵抗能力;构建敲低环状RNA-circ-VCAN的U373和T98G瞬时转染细胞株;CCK8实验检测敲低环状RNA-circ-VCAN后细胞的增殖能力;Westernblot检测NF-κB通路蛋白P-P65表达水平。结果 与正常胶质细胞(HA1800)相比,环状RNA-circ-VCAN在胶质瘤细胞(尤其是在U373和T98G)中高表达,差异均有统计学意义(P<0.05);细胞核质分离实验证明circ-VCAN主要存在细胞质中;circ-VCAN能抵抗RNaseR的消化;CCK8实验证明敲低circ-VCAN能抑制U373和T98G的细胞增殖(P<0.05);Westernblot检测敲低circ-VCAN后的U373和T98G细胞显示NF-κB通路蛋白P-P65表达水平减少。结论 在胶质瘤细胞中敲低circ-VCAN能减慢胶质瘤细胞的生长,提示circ-VCAN可能成为一个新的治疗靶点。
中图分类号: